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上海恒遠(yuǎn)告訴您小鼠ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)中需要具有的四個(gè)條件選擇

閱讀次數(shù)：958 發(fā)布時(shí)間：2014/3/17 13:55:59

我公司三月中旬上新了一批新的elisa試劑盒，“三八”促銷還沒結(jié)束呢，需要的快快來購買哦！我們從ELISA實(shí)驗(yàn)的廣泛性來說，讓很多朋友們都對(duì)其有所了解，以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。上海恒遠(yuǎn)告訴您小鼠ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)中需要具有的四個(gè)條件選擇。

1、固相載體的選擇

許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。ELIAS試劑盒目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，ELIAS試劑盒在使用前均可進(jìn)行篩選，用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

2、酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇

首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法”，在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

3、酶的底物及供氫體的選擇

對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用，ELIAS試劑盒應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

4、包被抗體或抗原的選擇

將抗體或抗原吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。

以上就是我們今天所說的內(nèi)容了，試劑盒打折還送小禮物，距離活動(dòng)結(jié)束時(shí)間僅剩下不到十天了，您需要購買的話抓緊時(shí)間啦，我公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。